Medición de la expresión de genes que determinan la pluripotencialidad de iPSCs derivadas de fibroblastos extraídos de un paciente sano y con Alzheimer mediante un RT-qPCR

dc.contributor.authorRojas, Florencia
dc.contributor.authorAguilar, Javiera
dc.contributor.authorAstorga, Catalina
dc.contributor.authorDel Río, Begoña
dc.contributor.authorLin, Hiuyin
dc.contributor.authorSoto, Javiera
dc.date.accessioned2022-08-09T19:26:24Z
dc.date.available2022-08-09T19:26:24Z
dc.date.issued2021
dc.description.abstractEl Alzheimer es un desorden neurodegenerativo progresivo que se presenta luego de los 65 años y su prevalencia mundial es de 14,4 millones de personas. Por lo anterior, se ha ahondado en tratamientos personalizados y pruebas in vitro de fármacos para el Alzheimer considerando a las iPSC como posibles candidatas. Este estudio cuantitativo, cuyo objetivo, no basado en una hipótesis, busca analizar y comparar el perfil de expresión de marcadores de pluripotencialidad de iPSCs derivadas de fibroblastos adultos humanos, tanto de un sujeto sano como de otro con Alzheimer, y determinar si efectivamente son pluripotentes. Se reprograman fibroblastos de la piel mediante transfección de plásmidos por electroporación, obteniendo 9 clones de iPSCs. Se aisla el ARN total de los clones, se asegura pureza y calidad de la muestra, sumado a su digestión y retrotranscripción. Mediante RT-qPCR se selecciona el gen normalizador y se analiza la expresión de los genes Oct-4 endógeno y exógeno, Sox-2 endógeno y exógeno, NANOG y el gen normalizador seleccionado. Finalmente se comprueba si hay diferencia significativa entre los clones. Se observa una menor variación en la expresión de RPL13a y se selecciona como gen normalizador. Las iPSCs derivadas del sujeto sano presentan una mayor expresión de Oct-4 endógeno (p<0,05) en comparación con el sujeto con Alzheimer. No existen diferencias estadísticas en la expresión de Sox-2 entre ambos sujetos. A futuro, se sugiere el uso de RPL13a como gen normalizador en la determinación del nivel de expresión de genes de pluripotencia de IPSCs derivadas de fibroblastos.es
dc.description.versionVersión publicadaes
dc.identifier.citationRojas Espejo, F., Aguilar Danon , J., Astorga Rocha , C., Del Río Fernández, B., Lin Aguilera, H., & Soto Lizana, J. (2021). Medición de la expresión de genes que determinan la pluripotencialidad de iPSCs derivadas de fibroblastos extraídos de un paciente sano y con Alzheimer mediante un RT-qPCR . Revista Confluencia, 4(1), 40-45. Recuperado a partir de https://revistas.udd.cl/index.php/confluencia/article/view/570es
dc.identifier.urihttps://revistas.udd.cl/index.php/confluencia/article/view/570es
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11447/6451
dc.language.isoeses
dc.subjectCélulas IPSes
dc.subjectAlzheimeres
dc.subjectRT-qPCRes
dc.titleMedición de la expresión de genes que determinan la pluripotencialidad de iPSCs derivadas de fibroblastos extraídos de un paciente sano y con Alzheimer mediante un RT-qPCRes
dc.typeArticlees
dcterms.sourceRevista Confluenciaes

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