Extrusomas de células natural killer: Vesículas artificiales derivadas de células como una alternativa innovadora de encapsulamiento de fármacos para el cáncer de pulmón
Date
2024
Type:
Thesis
item.page.extent
166 p.
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Acceso abierto
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Publisher
Universidad del Desarrollo. Facultad de Medicina
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Abstract
El cáncer de pulmón (CP) tiene la tasa de mortalidad más alta a nivel mundial.
Su patogénesis es multifactorial y, aunque se recomiendan terapias dirigidas, muchos pacientes deben depender de tratamientos clásicos (por ejemplo, quimioterapia), los cuales presentan limitaciones (efectos adversos, resistencias al tratamiento, entre otros). Los extrusomas (EXT), o vesículas derivadas artificialmente de células (ACDVs), han surgido como una herramienta prometedora para superar las barreras de la traslación hacia la clínica que presentan actualmente los tratamientos acelulares basados en vesículas.
Este estudio propone la generación de EXTs encapsulados con docetaxel (DTX) a partir de células Natural Killer (NK) humanas (DTX-EXTs) y evaluar su internalización en células de CP y su efecto citotóxico. También se realizaron análisis preliminares utilizando macrófagos polarizados a fenotipo M1 (EXTs-M1) para validar este método como una estrategia prometedora en la producción de ACDVs para la liberación de fármacos en el tratamiento del CP.
Los EXTs se generaron por extrusión celular y se evaluaron su morfología, estabilidad y composición. Se midió su efecto citotóxico en células de cáncer de pulmón, y se investigaron los mecanismos de captación celular mediante inhibidores de diferentes vías de endocitosis.
Los EXTs-NK y EXTs-M1 mostraron una morfología en forma de copa (tamaño medio <200 nm), los EXTs-NK tuvieron composición estable y su análisis Proteómico reveló proteínas presentes de manera diferencial asociadas con las características de las vesículas extracelulares (EV) y los marcadores de células NK, además de un patrón de enriquecimiento proteico distintivo. Se observó un efecto citotóxico significativo con los tratamientos EXT-DTX en comparación con los EXTs y EVs en ambas líneas celulares, con mayor eficacia en las células A549; la inducción de apoptosis corroboró estos hallazgos. Los estudios de internalización identificaron una localización perinuclear y la participación de la endocitosis mediada por clatrina como mecanismo principal en todos los grupos de vesículas.
Similar fueron los hallazgos obtenidos para los EXTs-M1, en donde los DTX EXTs-M1 fueron más eficaces en la reducción de la viabilidad celular en las líneas de CP H1975 y H1299. Asimismo, se identificó preliminarmente, la endocitosis mediada por clatrina como principal mecanismo de internalización en células H1975.
En conjunto, los resultados de este estudio sugieren que el uso de EXTs derivados de células inmunes, ofrece un enfoque prometedor para mejorar la
entrega de quimioterapéuticos como el DTX, permitiendo reducir las dosis necesarias y, en consecuencia, minimizar los efectos adversos, lo que podría
traducirse en una mejora en la calidad de vida de los pacientes con CP.
Description
Tesis presentada a la Facultad de Medicina de la Universidad del Desarrollo para optar al grado de Doctor en Ciencias e Innovación en Medicina
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Santiago
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Citation
Keywords
090036S, Cáncer, Pulmones, Extrusomas, Vesículas extracelulares, Quimioterapéuticos, Cáncer de pulmón.