Lobos, LorenaSepúlveda Guevara, Francisca Soledad2025-10-202025-10-202025https://hdl.handle.net/11447/10362Tesis presentada a la Facultad de Medicina de la Universidad del Desarrollo para optar al grado académico de Doctor en Ciencias e Innovación en MedicinaEn la actualidad, el cáncer es un importante problema a nivel mundial, además, se ubica dentro de las principales causas de muerte en los diferentes países. El cáncer más diagnosticado entre mujeres en el mundo es el cáncer de mama, siendo la principal causa de muerte por cáncer. Esta enfermedad es compleja, ya que su progresión está influenciada por el microambiente tumoral. Entre sus componentes celulares, los adipocitos desempeñan un rol fundamental al ser el tipo celular predominante en la glándula mamaria. En el contexto tumoral, estos adipocitos son reprogramados por las células tumorales, adquiriendo un fenotipo alterado conocido como adipocitos asociados a cáncer (CAAs). Esta comunicación adipocitos-células tumorales puede ser mediada por la secreción de factores solubles y/o vesículas extracelulares (EVs), generando cambios a nivel fenotípico y funcional en ambas células lo cual favorece la progresión tumoral; sin embargo, también se pueden inducir cambios sobre otras células del microambiente. Las EVs han sido descritas como capaces de modulares funciones celulares a distancia, aunque su impacto en la progresión del cáncer de mama, particularmente de las EVs secretadas por CAAs, no ha sido completamente elucidado. En esta tesis se propuso caracterizar el efecto funcional de las EVs secretadas por adipocitos expuestos a medio condicionado de células metastásicas y esferoides de cáncer de mama (3T3L1-AD + MC + Esferoides MDA-MB-231) sobre procesos claves de la progresión del cáncer de mama: migración celular, angiogénesis y adquisición de características cancer stem cell (CSC). Para ello, se estableció un modelo in vitro basado en la diferenciación de pre-adipocitos 3T3-L1 en adipocitos y estos 3T3L1-AD + MC + Esferoides MDA-MB-231: utilizando un modelo con medio condicionado y esferoides de la línea celular MDA-MB-231. Se purificaron EVs de las diferentes poblaciones celulares (vide supra), fueron caracterizadas mediante técnicas de microscopía electrónica y análisis de tamaño y concentración. Posteriormente, estas EVs fueron utilizadas para realizar los ensayos funcionales de migración en células epiteliales humanas MCF10-A y metastásicas humanas MDA-MB-231, de angiogénesis en células humanas HUVEC y EA.hy926, de formación de esferoides en MCF10-A y MDA-MB-231 y de formación de tumores in vivo en ratones inmunosuprimidos NOD/SCID para cuantificar el número de vasos sanguíneos en las capas proliferativas. Los resultados indican que las EVs secretadas por 3T3L1-AD + MC + Esferoides MDA-MB-231 promueven la migración celular y potencian la capacidad de formación de esferoides en las líneas celulares MCF10-A y MDA-MB-231, lo que sugiere un impacto a nivel de plasticidad celular. Mientras que no se observa un efecto de las EVs de 3T3L1-AD + MC + Esferoides MDA-MB-231 sobre el proceso de formación de polígonos en ambas líneas celulares utilizadas. Si bien en el análisis de miRNAs no se observaron diferencias significativas en la carga de ciertos miRNAs seleccionados, un ensayo de secuenciación podría complementar esta información. En conjunto, estos hallazgos refuerzan la hipótesis de que los 3T3L1-AD + MC + Esferoides MDA-MB-231, a través de la secreción de EVs, contribuyen a la remodelación del microambiente tumoral, potenciando fenotipos asociados a mayor agresividad en el cáncer de mama. Si bien en esta tesis no estamos abordando mecanismos moleculares ni vías de señalización, este trabajo es generación de conocimiento, como lo fue hace años atrás la definición de Fibroblastos Asociados a Cáncer, o Macrófagos Asociados a Cáncer. Sumado a que este trabajo aborda el rol que tienen las vesículas que secretan estos adipocitos expuestos a medio condicionado y esferoides de células metastásicas de cáncer de mama MDA-MB-231 (3T3L1-AD + MC + Esferoides MDA-MB-231).171 p.es090036SCáncer de mamaAdipocitosVesículas ExtracelularesThesishttps://doi.org/10.52611/11447/10362