Martínez Arenas, JessicaEzquer, MarceloJaldin Crespo, Limberg2024-08-062024-08-062024https://hdl.handle.net/11447/9222Tesis presentada a la Facultad de Medicina Clínica Alemana-Universidad del Desarrollo, para optar al grado de doctor (PhD) en Ciencias e Innovación en Medicina.Las complicaciones en el tratamiento de heridas crónicas representan un desafío significativo para la medicina moderna. En este sentido, la necesidad de enfoques terapéuticos integrales y potentes en el cuidado de heridas es cada vez más crítica, dado que una herida infectada, con una colonización bacteriana mayor a 105 UFC/ml, puede desencadenar inflamación crónica y estrés oxidativo, resultando en tiempos de curación prolongados o incluso en complicaciones severas como amputaciones y shock séptico. Al respecto, la presente tesis se enfocó en evaluar el potencial de combinar de manera sistemática y racional productos naturales, como el extracto de propóleo (EP) y el extracto de hoja de olivo (EHO), con nanopartículas de cobre estabilizadas en miel (H-CuNP) como una posible alternativa terapéutica. En primer lugar, partimos con la síntesis de dos lotes de H-CuNP mediante un método verde de reducción asistida por ultrasonido, estableciendo un protocolo reproducible y obteniendo partículas con características controladas. Las nanopartículas fueron caracterizadas utilizando técnicas como espectroscopia UV, TEM/SEM, NTA, DLS y DRX, confirmando la presencia de H-CuNP metálicas con propiedades fisicoquímicas similares a las descritas en la literatura. Simultáneamente, se estableció un proceso de estandarización para asegurar la calidad del EP y EHO, se evaluó el contenido fenólico y la capacidad antioxidante del EP y el EHO, demostrando que el EHO posee un mayor contenido de polifenoles totales y mayor capacidad antioxidante en comparación con el EP. En segundo lugar, se evaluó la actividad antimicrobiana (IC50) de los extractos naturales (EP y EHO) y las H-CuNP, frente a bacterias prevalentes en heridas crónicas, como S. aureus (Gram+) y P. aeruginosa (Gram-). Aquí se evidenció una mayor efectividad de las H-CuNP (IC50:67 μg/ml) y EP (IC50:33 μg/ml) frente a P. aeruginosa y S. aureus respectivamente. Los estudios de viabilidad celular in vitro revelaron que las H-CuNP exhiben un IC50 más bajo (60 μg/ml), indicando mayor toxicidad celular comparada con el EP (IC50: 125 μg/ml) y el EHO (IC50: 250 μg/ml). La evaluación del cierre de herida in vitro demostró que las H-CuNP (50 μg/ml), EP (125 μg/ml) y EHO (250 μg/ml) inhiben la migración de fibroblastos dérmicos humanos (HDF). Para la optimización de combinaciones, se utilizaron dos metodologías: el enfoque del Mayor Agente Único y el Diseño de Compuesto Central rotatorio (DCC). Lo cual permitió identificar combinaciones de H-CuNP, EP y EHO, con una capacidad superior para: inhibir radicales DPP, inhibir bacterias tanto ATCC como multi-drogo-resistentes y manteniendo una viabilidad celular similar a la de sus componentes individuales. Estos hallazgos sugieren que la combinación de H-CuNP con extractos de propóleo y hoja de olivo puede ser una opción efectiva y multifuncional para el tratamiento de heridas crónicas, donde es crucial reducir la colonización bacteriana y regular el estrés oxidativo. Esta estrategia innovadora presenta un potencial tratamiento para heridas infectadas, contribuyendo a la lucha contra la resistencia antimicrobiana y previniendo la cronicidad de las heridas.91 p.es090036SNano-formulaciónNanopartículas de cobre estabilizadas en miel (H-CuNP)Optimización de mezclasPropóleoHeridasTratamientoOlivoThesishttps://doi.org/10.52611/11447/9222